qPCR项目

mRNA

借助荧光染料或荧光标记的特异性探针，在PCR扩增期间（变性-退火-延伸）实时监测PCR反应体系中的荧光信号强度的变化，荧光信号的强度与PCR扩增产物的含量成正比，从而实现对目的基因表达水平的检测。

技术应用

应用于基因表达丰度、拷贝数等研究及临床疾病检测（新冠）等许多领域。

基本流程

结果展示

样本要求

样品及尽可能详细的背景信息（如物种信息，扩增目的基因NCBI登录号，相关文献和样品来源等）。

样品：组织应不少于100 mg；

细胞10^6-10^7个细胞；

细胞或组织裂解液总RNA浓度须大于1 mg/mL，单个样品不少于50 μL；cDNA不少于30 μg。

（组织需液氮速冻、细胞收获后加入Trizol保存于-80度。样品用干冰寄送。避免各类污染和反复冻融。）

技术优势

①高灵敏度和高特异性：通过荧光信号的实时监测，可以精确定量目标DNA序列的丰度，具有高灵敏度和高特异性。

②快速和高通量：qRT-PCR反应时间相对较短，可以在较短时间内完成大量样品的分析，适用于高通量实验。

③定量范围广：qRT-PCR可以在非常低的目标DNA浓度范围和非常高的目标DNA浓度范围内进行定量，具有广泛的定量范围。

④可靠性和准确性：通过内部标准和质量控制，可以减少样品间和批次间的变异性，提高结果的可靠性和准确性。

⑤多功能性：qRT-PCR可以应用于基因表达分析、病原体检测、突变分析、miRNA研究等多个研究领域，具有广泛的应用潜力。